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DuRed® 核酸染料(10000× 水溶液)

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DuRed® 核酸染料(10000× 水溶液)

  • 所属分类:生化试剂

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  • 发布日期:2018/07/04
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详细介绍


1.安全无毒:独特油性大分子使其不能穿透细胞膜进入细胞内,艾姆斯氏实验表明,该染料的诱变性远远小于EB。

2.灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响小于SYBR Green I。

3.稳定性高: 适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶;室温下在酸或碱缓冲液中极其稳定。

4.耐光性强:实验室的日常光线照射下稳定6个月。

5.信噪比好:样品荧光信号强,背景信号低,荧光亮度是EB的十倍以上,肉眼可观测到亮度明显比EB强。 

6.操作简单:与EB 一样,在预制胶和电泳过程中染料不降解;而电泳后染色过程也只需30 分钟且无需脱色或冲洗 ,即可直接用紫外凝胶透射仪观察。

7.适用范围广:可选择电泳前染色(胶染法)或电泳后染色(泡染法);适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳;可用于 dsDNA、ssDNA 或 RNA 染色。 

8.完美兼容:与EB有相同的光谱特性,无需改变滤光片及观察装置:标准的 EB 滤光片或 SYBR 滤光片都适用,使用与观察EB相同的普通紫外凝胶透射仪观察即可,在 300nm 紫外光附近可得到最佳激发。

产品包装:   DuRed® 10000x Nucleic Acid Dye  500uL/支                  储存条件: 2-8℃避光干燥可保存24个月。

操作步骤:

一.胶染法(推荐方法,用法类似EB)

制胶时加入DuRed® 核酸染料(染料灵敏,每100mL 琼脂糖溶液中加入3~5μL DuRed® 原装液即可)。 按常规方法电泳。

1. 实验室材料和试剂:

(1)实验样品:质粒DNA,DNA marker

(2)试剂:10X TBE电泳缓冲液[Tris 107.8146g (890mM),硼酸55.0287g(890mM),EDTA 5.845g(20mM),加NaOH约4g调节pH8.3定容1000ml];用ddH2O稀释10倍配制1X TBE电泳缓冲液; 溴酚蓝指示剂,1%的西班牙琼脂糖凝胶,DuRed®核酸染料

(3)仪器:电泳仪(100v),移液器(0.5~10ul),凝胶成像仪

2. 实验步骤:

(1)制胶:将0.5g琼脂糖溶于50mL 1X TBE电泳缓冲液中,加热至琼脂糖完全融化。将融好的琼脂糖溶液室温放置40~50℃左右时加入1~2ul的DuRed®凝胶电泳染料,混匀。

(2)倒胶:将制好的琼脂糖凝胶缓慢倒于制胶托盘内,避免产生气泡。将点样梳子垂直置于电泳胶膜的一端,距离托盘底部约1mm。放置时尽量保持平稳,切勿晃动。

(3)置胶:待约20分钟左右胶体凝固后,缓慢垂直向上拔起点样梳子,切勿用力过猛。

(4)将琼脂糖凝胶放入电泳槽内,加入电泳缓冲液,使电泳缓冲液液面高于凝胶面约1~2mm。

(5)将混合溴酚蓝指示剂的DNA样本(1ul溴酚蓝与2ul DNA标本混合)加入到点样孔内。

(6)盖上电泳槽盖,开启电源,使DNA从负极移向正极恒压电泳(电压恒定在100~120v之间,一般是5V/cm)。

(7)当DNA条带距离点样孔约1~2cm后关闭电源,(约30~40分钟)取出凝胶。

(8)用 312nm 激发的 UV 凝胶成像系统观察结果。。 

*注:此方法染色染料用量相对较少。500μL染料大约可以做200~500块 50mL的胶。染料加入胶中可直接使用微波炉加热,制好的胶溶液可以在室温下保存直至用完。


相关标签:核酸提取纯化

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